LH DETECT® est un dosage immunoenzymatique de type ELISA sandwich. L'activité enzymatique est révélée à l'aide d'un substrat chromogène.

L'intensité de la réaction est proportionnelle à la concentration de LH contenue dans l'échantillon. L'évaluation peut être effectuée à l'œil (étude qualitative) ou mesurée à l’aide d’un spectrophotomètre.

Pour un dosage qualitatif, un échantillon de contrôle positif permet la validation de la réaction. Pour cette utilisation, nous recommandons le substrat ABTS

Pour un dosage quantitatif, une gamme étalon, réalisée avec la LH de l'espèce concernée, est utilisée comme référence. Dans ce cas de figure, le substrat TMB est le plus approprié.

Vous pouvez également choisir entre deux types de plaques: entière, ou sécable par barrettes de 16 puits. Cette dernière vous évite de décongeler une plaque entière dans le cas d'utilisations plus ponctuelles.

LH DETECT® peut être utilisé chez les bovins pour les travaux suivants :

• Étude précise et quantitative de la micropulsatilité de la sécrétion de LH : faire des prélèvements toutes les 15 mn sur une période de 10 heures (Khireddine et al., 1998).

• Détection du pic préovulatoire de LH sur des vaches ayant reçu un traitement de synchronisation de l'œstrus et de l'ovulation (CRESTAR) :

  Deux protocoles ont été décrits :

  • Réalisation du dosage à partir de prises de sang effectuées toutes les heures, de 29 h à 49 h après retrait de l'implant (vaches Charolaises) (Khireddine et al., 1998).

  • Détection de l'œstrus toutes les 4 heures dès le retrait de l'implant et réalisation du dosage de LH à partir de prises de sang effectuées toutes les 4 heures, pendant 24 heures à partir de l'apparition confirmée de l'œstrus. Pour les femelles à œstrus tardif, les prises de sang sont poursuivies jusqu'à 72 heures après retrait de l'implant (vaches Culardes) (Maurel et al., 1994b).

    Le même type de protocole de prélèvements peut être réalisé après la détection d'œstrus dans le cas d'une insémination artificielle réalisée sur chaleurs naturelles.

• Détection du pic préovulatoire de LH sur des génisses ayant reçu un traitement de super ovulation :
  

  Deux protocoles ont été décrits :

  • Après une pré-synchronisation des œstrus, les femelles (vaches Culardes) reçoivent 8 injections de FSH porcine (Stimufol). Le pic de LH est détecté à partir des prises de sang réalisées toutes les 3 heures, pendant 42 heures, à partir de la dernière injection de FSH jusqu'à la 2ème IA (Maurel et al., 1994a).

  • Après une pré-synchronisation des œstrus, les femelles (vaches Charolaises) reçoivent un traitement FSH (Stimufol). Pour la détection du pic de LH, des prises de sang débutent soit 24 heures après la fin d'un traitement CIDR-B (lot expérimental), soit 12 heures après l'injection de prostaglandines (lot contrôle). Elles sont effectuées toutes les 3 heures, pendant 36 heures (Lafri et al., 2002).